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仪器简介:
适用范围:
生物化学、合成化学、天然产物、药物开发、食品化学、农业化学、化妆品、聚合物与石化等行业的科研与制备。可进行离子交换层析、亲和层析 凝胶过滤层析、疏水作用层析等方法,用于 蛋白质、酶、核酸、核苷酸、多肽、(含/不含芳香族氨基酸)及其它任何有紫外吸收的生物/非生物样品的分离分析、流动检测,是生物分子纯化的理想选择。
主要特点:
我公司生产的高性能双光束核酸蛋白紫外检测仪与市场上单光束核酸蛋白紫外检测仪比较:
一、光源不同、单色性精度达99。9%
二、光路不同,稳定性时间小于20 分钟内。
三、价格一样,性价比高
核酸与蛋白测试原理
蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。它们具有吸收紫外光的性质,其吸收高峰在280nm波长处,且在此波长内吸收峰的光密度值与其浓度成正比关系,故可作为蛋白质定性、定量测定的依据,正因为如此,280nm处的紫外吸收法通常被用于层析系统中蛋白质浓度的连续监控。但由于各种蛋白质的酪氨酸和色氨酸的含量不同,故要准确定量,必需要有待测蛋白质的纯品作为标准来比较,或且已经知道其消光系数作为参考。另外,不少非蛋白物质在280nm波长下也有—定吸收能力,可能发生干扰。其中尤以核酸(嘌呤和嘧啶碱)的影响更为严重。在280nm处的吸收比蛋白质强10倍(每克),但核酸在254nm处的吸收更强,其吸收高峰在254nm附近。核酸254nm处的消光系数是280nm处的2倍,而蛋白质则相反,280nm紫外吸收值大于254nm的吸收值。通常:
纯蛋白质的光吸收比值:A280/A254 >> 1.8
纯核酸的光吸收比值: A280/A254 << 0.5
因此蛋白质溶液中同时存在核酸时(生物体系大多数如此),必须同时测定OD254nm,与OD280nm。然后根据两种波长的吸收度的比值,通过经验公式校正,以消除核酸的影响而推算出蛋白质的真实含量。
蛋白质浓度=1.45×A280-0.74×A254 (mg/ml)
此经验公式是通过一系列已知不同浓度比例的蛋白质(酵母烯醇化酶)和核酸(酵母核酸)的混合液所测定的数据来建立的。
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